O trabalho apresentado demonstra e discute o desenvolvimento de método cromatográfico para separação e determinação de oito defensivos agrícolas com atendimento aos critérios da Química Verde, através da substituição da fase móvel do método cromatográfico de referência por um solvente menos agressivo ecologicamente. A análise de defensivos agrícolas se faz necessária devido à elevada taxa de liberação desses compostos, pelo governo brasileiro, nos últimos anos e consequentemente maior contaminação de variados ecossistemas, podendo chegar inclusive às mesas dos consumidores. Essas substâncias possuem uso liberado para uma gama de plantações e no Brasil, os teores para utilização são apresentados nos índices monográficos da ANVISA. A determinação analítica de defensivos agrícolas envolve etapas que podem ser realizadas através de diferentes técnicas associadas a variados métodos que vem sendo desenvolvidos e validados com o objetivo de apresentar maior confiabilidade, além do atendimento aos requisitos da legislação e atualmente apresentando propostas baseadas nos princípios da Química Verde. Nesse sentido, o método desenvolvido apresentou bons resultados com valores de fator de retenção (k), fator de separação (α), número de pratos teóricos (N) e resolução (Rs) acima dos valores estabelecidos para boas separações cromatográficas. Além disso, apresentou resultados excelentes para as métricas de análise verde com alta pontuação na eco-escala e boa apresentação no pictograma de NEMI. A análise também apresentou valores que indicaram a linearidade do método com boa precisão, seletividade e sensibilidade com limites de detecção e quantificação nas faixas de 0,50 a 0,94 mg L-1 e 0,74 a 1,81 mg L-1, respectivamente.