Pós-Graduação

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Navegando Pós-Graduação por Orientador "Jesus, Paulo Roberto Ribeiro de"

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    Aquisição de tolerância à estresses abióticos: contribuição dos genes da família terpeno sintase em mamona (Ricinus communis. L)
    (Universidade do Estado da Bahia, 2022-07-28) Oliveira, Jonhenes Silva de; Jesus, Paulo Roberto Ribeiro de; Loureiro, Marta Bruno; Andrade, Marcos Vinicius Silva de
    Das dificuldades que permeiam o estudo dos terpenos, destaca-se a complexidade que envolvem os genomas das espécies envolvidas e as restrições quanto ao estudo das vias biossintéticas para a maioria destes compostos. Este trabalho objetivou fornecer subsídios teóricos e metodológicos para a obtenção de linhagens de Ricinus communis com elevada tolerância à estresses abióticos que possam ser utilizadas em programas de melhoramento genético e para o desenvolvimento de cultivares que possam ser plantadas pelo pequeno agricultor rural, mediante caracterização bioquímica e molecular do comportamento de genes da família terpeno sintase. Os resultados obtidos neste trabalho identificaram 46 genes responsáveis pela produção de enzimas altamente especializadas e conhecidas como Terpeno sintase. .A localização subcelular, distribuição de éxons, íntrons, regiões regulatórias transcricionais bem como elementos cis promotores são relatados. A designação de subfamílias (TPS-a – TPS-g) são apresentadas de acordo com a classificação de motifs conservados encontrados nas sequências e estrutura dos genes. Foram encontrados em todos os genes domínios C-terminal e N-terminal no Pfan característicos das enzimas terpenos sintase (PF01397 e PF03936). Além disso, foram encontrados nos genes padrões de motifs conservados, DDXXD, DXDD, NSE/DTE e RRX8W. Sequências de TPS foram alinhadas frente outras espécies modelos e foi comprovado a presença do motif canônico DDXXD, essencial para a regulação enzimática que catalisa a primeira ionização em IPP e DMAPP. Para analisar os efeitos da temperatura (20, 30 e 35 °C), concentração salina (25 mM; 50 mM; e 100 mM de NaCl) e déficit hídrico (-0,2 MPa; -0,6 MPa e -1 MPa) em plântulas de Ricinus communis do genótipo Paraguaçú, foi medido o comprimento de raízes e hipocótilos e a massa seca das raízes, hipocótilos, endospermas e cotilédones após 72 horas de germinação e submetidas aos estresses. forma geral comprometeu a alocação de biomassa nas raízes, hipocótilos, endosperma e cotilédones. Os comprimentos das raízes e dos hipocótilos evidenciaram um desvio da normalidade quando expostas ao estresse térmico em 20°C e não houveram diferenças significativas no comprimento das raízes e hipocótilos expostos à 35°C. Com estes achados, podemos observar possíveis translocações de biomassa, transferências de recursos que darão suporte a planta para atravessar os períodos de estresse.
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    Avaliação metabolômica e das atividades antioxidante, citotóxica e antimicrobiana de extratos da resina de Vellozia pyrantha A. A. Conceição
    (Universidade do Estado da Bahia, 2020) Ribeiro, Luiz Augusto Figueiredo; Jesus, Paulo Roberto Ribeiro de; Souza Neta, Lourdes Cardoso de; Santos, Regina Maria Geris dos
    A Vellozia pyrantha A. A. Conceição, conhecida como Candombá, é uma planta endêmica dos campos rupestres do Parque Nacional da Chapada Diamantina conhecida por suas propriedades inflamáveis e a sua grande capacidade de florescimento após queimadas sendo influenciadora do ciclo de nutrientes do bioma. Apesar do uso tradicional e da importância da espécie, não há relatos sobre a sua composição química ou atividades biológicas. O objetivo deste trabalho é obter, através de uma abordagem metabolômica, o perfil metabólico e avaliar as atividades antioxidante, antimicrobiana e citotóxica da resina e frações de V. pyrantha. O fracionamento da resina foi feito por cromatografia em coluna com gradiente de polaridade (Hexano-Acetato de etila-Metanol) resultando na obtenção de oito frações. A atividade antioxidante foi determinada pelo método do sequestro do radical livre 2,2- difenil-1- picril-hidrazil (DPPH) e os fenóis totais foram quantificados pelo método Folin-Ciocalteu. Os valores de IC50 para a atividade antioxidante variou de 205,48 µg mL-1 (fração 5) até 842,79 µg mL-1 (fração 7). Os valores de fenólicos totais variaram de 14,09 mg EAG g-1 (fração 8) até 154,26 mg EAG g-1 (resina brutta). A atividade antimicrobiana foi avaliada frente a bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e fungos através do método de microdiluição em caldo. Todas as amostras apresentaram atividade contra pelo menos um dos micro-organismos com valores de CIM e CMM entre 3,125 µg mL-1 e 500 µg mL-1 . A citotoxicidade das amostras foi avaliada pelo método do alamar blue contra diferentes linhagens de células tumorais. Nos testes in vitro todas as amostras apresentaram resultados promissores (IC50>30 μg mL-1 ), variando entre 6,96 μg mL-1 (fração 3 frente à B16F10) e 41,80 μg mL-1 (fração 1 frente à HepG2). O perfil metabólico foi obtido por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas (CLAE-EM) e avaliado por análise estatística univariada e multivariada, permitindo a identificação de 28 metabólitos. Diterpenos e norditerpenos de esqueleto isopimarano e cleistantano são os compostos majoritários identificados em todas as frações, sendo os principais candidatos responsáveis pelas atividades biológicas obtidas.